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品系详情
C57BL/6J-Fosem1(CreXER)/Fdmc
  • 联盟单位：
  • 描述：
基本信息
  • 品系简称：
    Fos-CreXER
  • 曾用名：
    -
  • 品系编号：
    MOE_RCLM_FD05881
  • 相关基因：
    基因符号 NCBI编号 MGI编号 染色体
    C-FOS 2353 95574 Chr14:75278828-75282230 bp, + strand
  • 资源分类：
    nervous system/神经系统,Conditional knockout(cKO),研究领域,神经系统,Cre/Dre工具鼠,工具鼠,组织器官,基因修饰模型,KnockIn(KI)
  • 活体：
    否
  • 精子：
    是
  • 胚胎：
    否
  • ES细胞：
    否
  • 表型数据：
    否
  • 描述：
    -
  • 外部链接：
    -
  • 联系方式：
    021-54237470
  • 邮箱信息：
    -
  • 品系制作技术类型：
    CRISPR-Cas9
  • 遗传背景：
    C57BL/6J
  • 品系策略和制作过程：
    本项目采用CRISPR/Cas9技术,通过同源重组的方式，在Fos基因终止密码子位点定点敲入2A-tTA2表达框。简要过程如下：通过体外转录的方式，获得Cas9 mRNA和gRNA；通过In-Fusion cloning的方法构建同源重组载体（donor vector），该载体包含2.9 kb 5’同源臂、2A-tTA2和3.0 kb 3’同源臂。将Cas9 mRNA、gRNA和donor vector显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中，获得F0代小鼠。PCR扩增及测序鉴定阳性的F0代小鼠与C57BL/6J小鼠交配获得10只阳性F1代小鼠。
  • 小鼠的基因型：
    纯合子：Fos-CreXER +/+； 杂合子：Fos-CreXER +/-。
  • 鉴定方案：
    PCR鉴定 P1 CCATGGTCACAGAGCTGGAG Forward P2 GAGGCCAGATGTGGATGCTT Reverse P3 AGCAATTCCTTGGGGATGGG Forward P4 TTCCTTGTCGTCAGGCCTTC Reverse 小鼠基因组使用引物对（P1，P2），（P3，P4）分别扩增： 野生型：只有（P1，P2）扩增出381 bp条带，（P3，P4）无条带； 杂合子：（P1，P2）扩增出381 bp条带，（P3，P4）也扩增出条带371 bp； 纯合子：（P1，P2）无条带，（P3，P4）可扩增出条带371 bp。
  • 表型特征：
    此工具鼠用于神经元活动性标记
  • 杂/纯合子的存活及繁育能力：
    纯合子（Fos-CreXER +/+）与杂合子（Fos-CreXER +/-）在无Cre背景下生长正常，繁育能力良好。纯合子小鼠可自然繁育，胎鼠比例符合孟德尔遗传学规律。
  • 已发表论文链接（DOI）（或未发表）：
    未发表
  • 参考文献：
    无
  • 其余特征：
    无